会员登录 - 用户注册 - 设为首页 - 加入收藏 - 网站地图 高效液相色谱指纹图谱评价泻白散及其3种单味药内在质量(二) 制成试验用泻白散粉末!

高效液相色谱指纹图谱评价泻白散及其3种单味药内在质量(二) 制成试验用泻白散粉末

时间:2025-05-09 21:19:49 来源:潮创云坊 作者:综合 阅读:121次

1.3 溶液制备

1.3.1 对照品溶液

精密称取桑辛素、高效甘草酸、液相药内异甘草素、色谱散及桑皮苷A、指纹质量地骨皮乙素、图谱芹糖甘草苷、泻白甘草素、其种异甘草苷、单味甘草苷、高效绿原酸、液相药内甘草酸铵、色谱散及东莨菪内酯、指纹质量大黄素对照品适量,图谱用甲醇配制成质量浓度分别为30、泻白82、其种53、65、60、20、95、100、77、85、80、165、38μg/mL的对照品溶液。

1.3.2 供试品溶液

按照《小儿药证直诀》中泻白散配比,取适量炒桑白皮、地骨皮、炙甘草,粉碎,过孔径为(250±9.9)μm(65目)筛,混合均匀,制成试验用泻白散粉末。精密称取1.00g泻白散粉末,加水至30mL,回流提取1h,放冷,补重,以3000r/min离心5min,过滤上清液,取续滤液10mL,按照体积比为1:1加入甲醇,混匀,静置过夜,过滤上清液,滤液经0.45μm微孔滤膜滤过,得泻白散供试品溶液,备用。同法分别制备不同批次的泻白散、炒桑白皮、地骨皮、炙甘草供试品溶液。

1.4 实验方法

采用高效液相色谱法,按1.2色谱条件测定泻白散及其3种单味药饮片样品溶液,得到各批泻白散、单味药高效液相色谱指纹图谱,计算各批泻白散样品之间、单味药样品之间、对照品与泻白散样品之间指纹图谱的相似度,对泻白散中的共有色谱峰进行指认。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件优化

分别考察了甲醇-甲酸水溶液、甲醇-磷酸水溶液、乙腈-甲酸水溶液、乙腈-磷酸水溶液系统对测定结果的影响,结果发现乙腈-0.1%甲酸水溶液条件下色谱峰分离度较好,基线稳定,故选择乙腈-0.1%甲酸水溶液进行优化梯度洗脱条件;分别比较60、100、120、150min的检测时间对测定结果的影响,结果发现120、150min均可检测出泻白散中所有的色谱峰,为节省时间,选择检测时间为120min;采用DAD-UV检测器对200~400nm检测波长进行考察,发现在254nm波长下,色谱峰最多,泻白散信息量最大,最终选择检测波长为254nm。

2.2 料液比的优化

《小儿药证直诀》记载泻白散制法及用法“上锉散,入粳米一撮,水二小盏,煎七分,食前服”,依据《浙江省中药炮制规范》(2015年版)确定炒桑白皮工艺为取桑白皮饮片,照清炒法炒至表面微黄,微具焦斑时,取出摊凉。参考王彦帅等确定的经典名方泻白散物质基准制备工艺:取炒桑白皮3.93g,焙地骨皮3.93g,炙甘草0.39g,粳米1.50g,加水360mL煎煮,料液比约为1:37。遵循古代经方制法、煎煮原则,分别将炒桑白皮、地骨皮、炙甘草粉碎,过孔径为(250±9.9)μm筛,进行加热回流提取,最终确定料液比为1:30,较为接近古代煎煮工艺。

2.3 方法学验证

2.3.1 精密度试验

取桑皮苷A对照品溶液,在1.2色谱条件下连续进样6次,记录色谱峰面积。结果显示,测定结果的相对标准偏差为0.21%,表明仪器精密度良好。

2.3.2 稳定性试验

取泻白散组方X10样品,按1.3.2制备样品溶液,在1.2色谱条件下,分别在0、2、4、8、12、24h进样6次,记录色谱峰面积。结果显示,色谱峰面积测定结果的相对标准偏差为0.25%~1.02%,其中各主要色谱峰保留时间无明显变化,测定结果的相对标准偏差为0.01%~1.21%,表明样品稳定性良好。

2.3.3 重复性试验

取泻白散组方X10样品,按1.3.2制备样品溶液6份,在1.2色谱条件下各进1次,记录色谱峰面积。结果显示,色谱峰面积测定结果的相对标准偏差为0.25%~2.85%,其中各主要色谱峰的保留时间无明显变化,测定结果的相对标准偏差为0.13%~1.56%,表明该方法的重复性良好。

2.4 HPLC指纹图谱的建立

2.4.1 炒桑白皮指纹图谱测定

13批全国不同饮片企业市售桑白皮炒制品(S1~S13)按照1.3.2制备供试品溶液,在1.2色谱条件下测定,将色谱图导入中药指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版),HPLC指纹图谱匹配结果见图1。由图1可知,13个批次之间的相似度为0.024~0.975,差别非常大,炒桑白皮样品S8中,各成分的含量非常低,虽然外观性状符合炒桑白皮正品特征,但内在质量非常差,推测该样品可能存放时间太久所致。除S8炒桑白皮样品外,其它12批炒桑白皮仅有7个共有峰。

2.4.2 地骨皮指纹图谱

将13批全国不同饮片企业市售地骨皮(D1~D13)按照1.3.2制备供试品溶液,在1.2色谱条件下测定,将色谱图导入中药指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版),HPLC指纹图谱匹配结果见图2。由图2可知,13个批次之间的相似度为0.061~0.983,差别非常大,地骨皮样品D11、D12、D13与其它样品的相似度非常低,D12、D13色谱峰数量及分布与其它地骨皮样品差别较大,虽然外观性状均符合地骨皮正品特征,但内在质量差异较大。13批地骨皮仅有4个共有峰。

声明:本文所用图片、文字来源《化学分析计量》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系

相关链接:桑白皮甘草酸甲酸甘草苷

(责任编辑:综合)

相关内容
  • 不可忽视的沙门氏菌:夏秋季为感染高峰期,儿童感染占比较高
  • 查案24件罚款428万余元 上海公布一批“刷单炒信”违法行为典型案例
  • 山东省青岛市市南区:守护“年夜饭”安全 市场监管在行动
  • 摇滚主唱熊家锐:从山村到湾区,音乐征途披荆斩棘
  • “进厂”上班 大有可为
  • 浙江:外卖商家不装阳光厨房、不使用外卖封签将被罚
  • 福州仓山:春节期间受理处置15起“菜篮子”价格投诉
  • 江苏南京:多措并举促节日消费更安心
推荐内容
  • 原神钟离四星武器挑选指南 适用性分析及实战推荐搭配
  • 番茄渣中番茄红素的提取工艺研究(二)
  • 番茄渣中番茄红素的提取工艺研究(二)
  • 深圳发布食用农产品监督抽检结果:12个销售点鲈鱼检出恩诺沙星残留
  • 2024年宿州市进出口总值65.6亿元
  • 番茄渣中番茄红素的提取工艺研究(二)